Hepatitis B marker seroprevalence and vaccination coverage in adolescents in the City of Itajaí, State of Santa Catarina, Southern Brazil, in 2008 / Soroprevalência de marcadores da hepatite B e cobertura de vacinação em adolescentes no município de Itajaí, Estado de Santa Catarina Sul do Brasil, em 2008

INTRODUCTION: Hepatitis B infection constitutes an important cause of morbidity and mortality worldwide. In Brazil, however, the current epidemiological situation is not clear. Considering the importance of establishing this prevalence, the aim of this study was to determine the prevalence of HBV markers in voluntary adolescents, junior high (secondary school) students, in the City of Itajaí, State of Santa Catarina, Brazil. METHODS: A seroepidemiological, transverse study was conducted with 353 randomly chosen adolescents from elementary school in 2008. Blood samples were analyzed for HBsAg, anti-HBc and anti-HBs. All analyses were conducted by automated microparticle enzyme immunosorbent assay (Abbott®, AxSYM system, Deerfield, IL, USA), according to the manufacturer's instructions. RESULTS: The prevalence of HBsAg was 0.6% (CI 95% 0.1 - 2.0), that of anti-HBc was 1.1% (CI 95% 0.3 - 2.9) and that of detectable anti-HBs was 83.6% (CI 95% 79.3 - 87.3). Hepatitis B vaccination coverage was 97.5% (CI 95% 95.2 - 98.8). CONCLUSIONS: These results demonstrate the success of the vaccination program against hepatitis B in the region studied and indicate that prevention strategies must be maintained and, if possible, expanded to contribute to the establishment of positive prevalence rates in all age groups.

INTRODUÇÃO: A hepatite B constitui uma causa relevante de morbidade e mortalidade em todo o mundo. No Brasil, entretanto, a situação epidemiológica atual não é claramente conhecida. Considerando-se a importância do estabelecimento de tal prevalência, o objetivo deste estudo foi determinar a prevalência dos marcadores de HBV em adolescentes voluntários, estudantes do ensino fundamental na Cidade de Itajaí, Santa Catarina, Brasil. MÉTODOS: Trata-se de um estudo soroepidemiológico, transversal, conduzido com 353 adolescentes do ensino fundamental, randomicamente selecionados, em 2008. As amostras de sangue foram analisadas quanto à presença dos marcadores HBsAg, anti-HBc e anti-HBs. Todas as análises foram conduzidas em ensaio imunoenzimático de micropartículas automatizado (Abbott®, AxSYM system, Deerfield, IL, EUA), de acordo com as instruções do fabricante. RESULTADOS: A prevalência do HBsAg foi de 0,6% (CI 95% 0,1 - 2,0), do anti-HBc foi de 1,1% (CI 95% 0,3 - 2,9) e de títulos detectáveis de anti-HBs foi de 83,6% (CI 95% 79,3 - 87,3). A cobertura vacinal nos adolescentes estudados foi de 97,5% (CI 95% 95,2 - 98,8). CONCLUSÕES: Estes resultados demonstram o sucesso do programa de vacinação contra a hepatite B na região estudada e indicam que as estratégias de prevenção devem ser mantidas e, se possível, expandidas para que contribuam no estabelecimento de taxas de prevalência positivas em todas as faixas etárias.

Níveis séricos de 25-hidroxi vitamina D em pacientes portadores de insuficiência renal crônica em tratamento dialítico / 25-hydroxy vitamin D levels in chronic kidney disease patients on dialysis therapy

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: A contribuição da deficiência de vitamina D para o desenvolvimento do hiperparatireoidismo secundário e da osteodistrofia renal motiva a racional suplementação de vitamina D. A sua deficiência tem sido associada,ainda, a elevado risco cardiovascular. O objetivo deste estudo foi descrever os níveis séricos de 25-hidroxi vitamina D em pacientes portadores de insuficiência renal terminal em terapia dialítica.MÉTODO: Dados clínicos e laboratoriais foram coletados em novembro de 2009 em 168 pacientes em terapia dialítica em um único centro. Os níveis séricos de 25-hidroxi vitamina D foram medidos utilizando o método automatizado de imunoensaio desenvolvido por DiaSorin. De acordo com o Kidney Disease Outcomes and Quality Initiative Guidelines, os pacientes foram classificados em três grupos: suficientes (> 30 ng/mL), insuficientes(15 a 30 ng/mL); e deficientes (< 15 ng/mL). A prevalência de deficiência ou insuficiência de vitamina D foi calculada. Para comparar as variáveis foram usados os seguintes testes: Qui-quadrado,Exato de Fisher e t de Student. O coeficiente de correlação de Spearman foi utilizado para variáveis contínuas. O valor de p < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.RESULTADOS: A média ± desvio padrão de 25-hidroxi vitaminaD foi 23,8 ± 13,3 ng/mL. A prevalência de deficiência devitamina D foi de 23,9% e de insuficiência foi de 47,8%. Quando se compararam as diferenças entre homens e mulheres, idade,albumina e fósforo foram inferiores nas mulheres (p < 0,05). Os níveis de 25-hidroxi vitamina D foram significantemente inferiores em pacientes em diálise peritoneal quando comparados aos em hemodiálise (p < 0,05). Na análise univariada houve pequena correlação positiva entre 25-hidroxi vitamina D e Kt/V.CONCLUSÃO: Os níveis de 25-hidroxi vitamina D foram baixos nesta população. Estudos prospectivos para avaliar o impacto desta deficiência se fazem necessários.(AU)

BACKGROUND AND OBJECTIVES: The contribution of vitamin D deficiency to the development of secondary hyperparathyroidism and renal osteodystrophy contributes the rationale for vitamin D supplementation. Vitamin D deficiency has been associated with elevated cardiovascular risk. This study aimed investigates the serum levels of vitamin D among patients undergoing dialysis.METHOD: In November 2009, we examined clinical and laboratory data from 168 patients in dialytic therapy in a unit. Serum level of vitamin D was included in laboratory data. Serum levels of vitamin D were measured using an automated, antibody and microparticle, chemiluminescence immunoassay method developedby DiaSorin. According to the Kidney Disease Outcomes and Quality Initiative guidelines, patients were assigned to thefollowing 3 groups: sufficient vitamin D serum level (> 30 ng/mL), insufficient level (15 to 30 ng/mL) and with severe deficiency(< 15 ng/mL). Prevalence of deficiency or insufficiency of vitamin D was calculated. To compare the variables were usedthe Chi-square, Fisher Exact or Student's t tests. Spearman correlation coefficient was used for continuous variables. A p value < 0.05 was considered statistically significant.RESULTS: Patient's serum vitamin D mean level was 23.8 ± 13.3 ng/mL. Prevalence of vitamin D deficiency was 23.9%. Prevalence of vitamin D insufficiency was 47.8%. When compared differences between men and women, age, albumin and phosphorus were inferior in women (p < 0.05). Levels of vitamin D were greatly inferior in peritoneal dialysis when compared with hemodialysis (p < 0.05). In the univariate analysis there were weak positive correlations between vitamin D and Kt/V.CONCLUSION: Serum vitamin D levels in this population were low. Prospective studies to assess the impact of low level of vitamin D in patients undergoing dialysis are warranted.(AU)

Real-time PCR-based quantification of Toxoplasma gondii in tissue samples of serologically positive outdoor chickens

This study aimed to quantify Toxoplasma gondii in tissue samples of serologically positive chickens using real-time polymerase chain reaction (PCR). Of 65 chickens evaluated, 28 were positive for T. gondii antibodies. Brain and heart samples were collected from 26 seropositive chickens and DNA was extracted using Trizol® and amplified using real-time PCR with SYBR® Green. Parasite DNA was detected in 24 of the 26 samples analyzed; the number of positive tissue samples and the parasite quantity did not differ between tissue types. The results confirmed the analytical sensitivity of parasite detection in chicken tissue samples and demonstrated the possibility of using other molecular systems for genotypic analysis.

Efeitos quantitativos da estocagem de sangue periférico nas determinações do hemograma automatizado / Storage effects on peripheral blood samples as identified from automated hemograms

O presente trabalho avaliou as possíveis alterações em vários parâmetros do hemograma (contagem de eritrócitos totais, hematócrito, concentração de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM), contagem total de leucócitos e contagem de plaquetas), frente a diferentes tempos de armazenamento da amostra em ambiente refrigerado a 4ºC e temperatura ambiente. As determinações foram realizadas através do contador automatizado Sysmex® XT2000i. As amostras sanguíneas foram obtidas de indivíduos sem alterações hematológicas diagnosticadas, sem clínica de doença, sendo considerados indivíduos com valores de referências hematológicos normais. Os resultados foram avaliados através de análise estatística descritiva e comparação de médias através da análise de variância (ANOVA). Os resultados dos parâmetros CHCM e contagem de plaquetas mostraram diferenças estatisticamente significativas para ambas as temperaturas de estocagem. Na temperatura ambiente, os parâmetros que também apresentaram diferença estatística significante foram para o hematócrito, VCM e índice de variação do tamanho dos eritrócitos ( RDW). Conclui-se, portanto, que os resultados dos hemogramas liberados pelo aparelho analisado podem ser satisfatórios quando realizados entre 12 a 24 horas após a coleta da amostra para a maioria dos parâmetros avaliados.

This study evaluated possible alterations in different hematologic parameters [total erythrocyte count, hematocrit, hemoglobin concentration, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MHCM), total leukocyte count and platelet count], of blood samples submitted to varied storage times at both 4ºC and at room temperature. The analyses were performed using a Sysmex XT2000i automated hematology analyzer. Written consent was obtained from donors with no hematological disorders or clinical abnormalities and thus from individuals with apparently normal laboratory reference values for healthy adults. The results were analysed by descriptive statistics with comparisons of the means being achieved by analysis of variance (ANOVA). The means of the MCHC parameters and platelet count showed significant statistical differences for both storage temperatures. At room temperature the hematocrit, MCV and red cell distribution width (RDW) readings also presented statistically significant differences. Therefore, it can be concluded that hemogram results performed by automated blood analyzers are satisfactory when carried out within 24 hours after drawing the blood sample for most of the parameters evaluated.

Validação do método de detecção de Chlamydia trachomatis por Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real / Validation of a Chlamydia trachomatis detection method by Real Time Polymerase chain reaction

Infecções causadas por Chlamydia trachomatis são recentemente reconhecidas como as mais prevalentes e estão entre as mais prejudiciais doenças sexualmente transmissíveis (DST) no mundo. A ausência de sintomas dificulta o diagnóstico clínico das infecções clamidiais. Um dos desafios na prevenção das infecções causadas por C. trachomatis é a disponibilidade de diagnósticos laboratoriais com alta sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade. No presente estudo, foi comparado o desempenho do testes de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) COBAS Amplicor® Chlamydia trachomatis (Roche) e PCR em tempo real (SYBR® – Green), usados para detecção de Chlamydia trachomatis em espécimes de urina e secreções urogenitais. O COBAS Amplicor® (Roche) é umteste de PCR convencional e foi usado como ferramenta para controle e teste de padrão ouro para diagnóstico no presente trabalho. Um total de 136 amostras de secreção endocervical (61), secreção uretral (14) e urina (61), foram obtidas de pacientes submetidos a testes de detecção de Chlamydia trachomatis no Laboratório Alvaro S/A. Os métodos de PCR em tempo real e COBAS Amplicor® (Roche)foram igualmente sensíveis para o diagnóstico de C. trachomatis em amostras de secreção uretral. Entretanto, em análises de urinae secreção endocervical o teste COBAS Amplicor® (Roche) mostrou 57% e 33% de positividade, respectivamente, contra 47% e 24% de positividade obtidos para as mesmas amostras usando a PCR em tempo real. A maior sensibilidade (100%) obtida usando-seo ensaio de PCR em tempo real, foi em análises das amostras de secreção endocervical. A PCR em tempo real, comparada com o teste padrão ouro, mostrou uma alta especificidade (100%) e um valor preditivo positivo de 100% para as diferentes amostras clínicas estudadas. Em conclusão, os dados apresentados neste estudo indicam que a PCR em tempo real mostrou um alto desempenho para detecção de C. trachomatis em diferentes espécimes clínicos...

Infections caused by Chlamydia trachomatis are now recognized as the most prevalent and are among the most damaging of all sexually transmitted diseases (STD) worldwide. Lack of symptoms makes clinical diagnosis of chlamydial infection difficult. One of the challenge in the prevention of C. trachomatis infections is the availability of laboratory diagnostics with high sensitivity, specificity and reliable. In the present study, the performance of conventional polymerase chain reaction (PCR) and Real-time PCR (SYBRR –Green) tests used for detection of Chlamydia trachomatis in urine and urogenital specimens were compared. The COBAS AmplicorR (Roche) is a conventional PCR and was used as a tool of control and gold standard test for diagnosis in this work. A total of 136 samples of endocervical secretion (61), uretral secretion (14) and urine (61), were obtained from patients submitted of Chlamydia trachomatis detection tests of Laboratório Alvaro S/A. Real-time PCR (SYBRR –Green) and COBAS AmplicorR Chlamydia trachomatis Test (Roche) methods were equally sensitivity for diagnostic of C. trachomatis in uretral secretion samples. However, in analyses of the urine and endocervical secretion samples the COBAS AmplicorR test displayed 57% and 33% of positivity, recpectively, against 47% and 24% of positivity obtained for the same samples using Real-time PCR. The highest sensibility (100%) using Real-timePCR assay was obtained in analyses of endocervical secretion samples. Real-time PCR, comparing with our gold standard showed a high spedificity (100%) and a positive predictive value of 100% for different clinical samples studied. In conclusion, the data presented in this study indicate that PCR - Real time have shown a high performance for detection of C. trachomatis in different clinical specimens. Moreover, this method can be used as a powerful tool in diagnostic and epidemiological investigation of infection associated with C. trachomatis.

Desenvolvimento e avaliação de um sistema automatizado biosseguro para o tratamento, reciclagem e descarte de resíduo de microbiologia clínica / Development and evaluation of a biosafe automatized system for treatment, recycling and discarding of clinical microbiology residues

No Brasil, diariamente, são descartadas 2,3 toneladas de meios de cultura potencialmente contaminados com microorganismos. A resolução RDC No 306/2004 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária preconiza que os resíduos devem ser tratados antes do descarte, visando à redução da carga microbiana. Foram desenvolvidos 2 métodos para avaliar a sensibilidade e a eficiência, assim como a concentração ideal, de um agente químico (biocida) contra microorganismos contaminantes. O método de difusão com Perfurador Circular de Ágar (PCA) e o método com Perfurador Linear de Ágar (PLA) foram testados com 13 cepas de microorganismos. O biocida avaliado foi a combinação de hipoclorito de sódio (NaClO) com ácido acético (CH3COOH). A partir destes resultados, foi desenvolvido um equipamento automatizado para processar a redução da carga microbiana (SADEMC) dos meios de cultura contaminados. A redução da carga microbiana foi avaliada pelo método quantitativo da reação da transcriptase reversa com detecção em tempo real. O método PCA mostrou ser reprodutível e eficiente para medir a inibição do crescimento bacteriano de um biocida. A concentração mínima de biocida capaz de reduzir o crescimento microbiano foi de 250 ppm para a solução aquosa de NaClO a 0,25% e de 200 ppm para a de CH3COOH a 0,2%. No SADEMC, foi possível processar 4,6kg de meios de culturas em 100 litros da concentração mínima eficaz do biocida por 15 minutos, e atingir uma redução da carga microbiana de, aproximadamente, 1,4E10 unidades formadoras de colônias. Podemos concluir que o SADEMC promove uma redução de carga microbiana compatível com os níveis exigidos pela RDC No. 306; fornece biossegurança na sua manipulação e que resulta em plástico reciclável

In Brazil, daily, 2.3 tons of potentially contaminated cultured medium with microorganisms are discarded. The RDC 306 resolution from the Brazilian National Health Department rules out that residue must be treated prior to discart in order to reduce microbial load. Two methods were developed to evaluate the sensitivity, efficiency and ideal concentration of a chemical agent (biocide) against microorganisms. The Ágar's Diffusion Method by Circular Perforator (PCA) and by Linear Perforator (PLA) were tested with 13 microorganism lines and the biocide composed by Sodium Hypochlorite (NaClO) and its combination with Acetic Acid (CH3COOH). The microbial load reduction was evaluated by the real time reverse transcription-polymerase chain reaction. From the in vitro data, an automatic equipment to process the potentially contaminated culture media (SADEMC) was developed. The PCA method was reproductive and efficient to measure the bacterial growth inhibition induced by the biocide. The minimum biocide concentration capable to reduce the microbial growth was a solution of 0.25% NaClO (250 ppm) and 0.2% CH3COOH (200 ppm). In the SADEMC, the direct exposition of 4.6 kg of culture media in 100 liters of biocide for a period of 15 minutes is capable to reduce the microbial load in approximately 1,4E10 of colony-forming unit. We may conclude that the SADEMC is able to promote a microbial load reduction more intense than the one demanded by the RDC 306 resolution. In addition to that, the SADEMC contemplates personnel safety and allows recycling the plastic residues

Estudo do perfil de hemoglobinas em 9, 189 testes realizados no Alvaro Centro de Análises e Pesquisas Clínicas / The characteristic of 9, 189 tests of hemoglobinopathy diagnostic from the Alvaro Center of Clinical Chemistry and Research in the 2004 year

As hemoglobinopatias são um grupo heterogêneo de distúrbios caracterizados por alterações que envolvem genes estruturais e promovem a formação de moléculas de hemoglobinas com variações polimórficas características. Essas alterações, denominadas variantes, possuem freqüências diversificadas, de acordo com distribuição geográfica e/ou étnica. Avaliou-se o perfil hemoglobínico dos testes realizados no Alvaro Centro de Análises e Pesquisas Clínicas, durante o ano de 2004. Foram analisados 9189 testes, realizados por cromatografia líquida de alta performance (HPLC), provenientes de todas as regiões do Brasil. Das amostras analisadas, 81,02% apresentaram perfil hemoglobínico normal, enquanto foi observado alteração em 18,98%. Destas, os perfis hemoglobínicos identificados foram: Hb AS 9,11%; sugestivo de beta talassemia 5,50%; Hb AC 2,47%; Hb SS 0,76%; Hb SC 0,39%; Hb CC 0,20%; PHHF 0,19%; Hb AD 0,18%; e outras formas raras de hemoglobinas em 0,18%. Observou-se que houve predomínio da prevalência de Hb AS (traço falciforme) entre os testes com perfil hemoglobínico alterado. Ainda, houve uma freqüência relativamente elevada de testes sugestivos de beta talassemia.

The hemoglobinopathies are a heterogeneous group of haemoglobin disturbs characterized by the structural genes mutations which results in polymorphic haemoglobin molecules. These abnormal hemoglobins are called “hemoglobin variants”. Their frequencies vary accordingly to the geographic region and/or ethnic group distribution. Quantification of the various hemoglobinic structures was performed in 9189 samples from all over Brazil. The variants hemoglobin frequency and beta-thalassemia were analyzed. The normal hemoglobinic structure and its variants were detected by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). We found 7445 (81.02%) samples presenting normal hemoglobin structure, Hb AA; whereas 1744 (18.98%) samples revealed some abnormality. The following characteristics were observed among the abnormal hemoglobins: Hb AS (9.11%); suggestive of beta thalassemia (5.50%); Hb AC (2.47%); Hb SS (0.76%), Hb SC (0.39%); Hb CC (0.20%); HPFH (0.19%); Hb AD (0,18%); and some other rare hemoglobins (0.18%). From our study, we were able to identify a major prevalence of sickle cell trait (Hb AS) among the various haemoglobin variants. In addition to that, we were able to identify a higher relative frequency of suggestive of beta-thalassemia tests in this population.

Comparação de dois métodos de PCR para detecção da mutação de Leiden no fator V / Comparison of two PCR methods for the detection of the factor V Leinden mutation

Um importante fator de predisposição genética para trombose venosa em humanos é uma mutação de G->A no nucleotídeo 1691 do gene que codifica o fator V da coagulação, conhecida como a mutação de Leiden. Técnicas de biologia molecular como a reação em cadeia da polimerase (PCR) tem demonstrado ser de grande importância na detecção dessa mutação. O objetivo do presente estudo é comparar os resultados de dois diferentes métodos, baseadas na técnica de PCR, na detecção da mutação de Leiden no gene do fator V. O primeiro método foi realizado usando o kit comercial AMS50 (Clonit), enquanto o segundo, um método publicadopor Hezard et al., 1997. Ambos os métodos detectam o alelo selvagem e o alelo mutado, e permitem classificar o genótipo como sendo homozigoto selvagem, heterozigoto ou homozigoto mutado. A análise do DNA extraído do sangue total de 38 indivíduos usando esses dois métodos de PCR forneceu os mesmos resultados, e permitiu identificar 32 indivíduos homozigotos selvagens e 6 indivíduos heterozigotos para a mutação de Leiden. Esses resultados confirmam a importância desses dois métodos, baseados na PCR, na detecção dessa mutação em rotina clínica laboratorial

Análise crítica da pseudosepticemia e falso negativo: valor diagnóstico das hemoculturas / Critical analysis of the pseudosepticemia and false negative: diagnostic value of the hemoculturas

A septicemia é uma das causas de morbidade e mortalidade em crianças e adultos. A dificuldade diagnóstica está associada tanto à obtenção de amostras, assim como ao sistema utilizado na cultura, seja automatizada ou manual. O objetivo foi determinar a freqüência de pseudosepticemia e falso negativo nos procedimentos automatizados e manuais em hemoculturas de dois centros diagnósticos: Hospital Universitário e um Centro de Análises e Pesquisas Clínicas. Utilizou-se Bactec 9240 e 9050 para hemocultura de 973 amostras, seguido de cultura em Agar sangue, Agar chocolate, MacConkey e Sabouraud. A identificação bacteriana foi realizada pelo sistema Vitek (automatizado) e manual utilizando provas bioquímicas em tubos. Estudo comparativo entre o sistema automatizado e o manual foi realizado utilizando 41 amostras de sangue. Os resultados mostram 12,33 porcento de positividade no total em ambos os centros. Das 932 culturas realizadas 3,86 porcento foram consideradas pseudo septicemias, e 8,47 porcento septicemias. As pseudo septicemias foram representadas por Staphylococcus coagulase negativa e as septicemias por: Staphylococcus aureus (19,0 porcento), Escherichia coli (13,9 porcento), Staphylococcus coagulase negativa (11,4 porcento), Acinetobacter baumanii (8,9 porcento ), Enterecoccus faecalis (7,6 porcento), Klebsiella pneumoniae (7,6 porcento), Enterobacter cloacae (5,1 porcento), Streptococcus pneumoniae (5,1 porcento ), outros (11,4 porcento) e leveduras (10 porcento ). Nas 41 culturas realizadas pelos sistemas automatizado e manual detectaram-se 5 e 3 amostras positivas, respectivamente, com resultado falso negativo de 40 porcento para o sistema manual. O percentual de hemoculturas positivas foi semelhante nos dois centros mostrando representatividade de amostra. A elevada incidência de pseudo septicemia enfatiza os cuidados pré-analíticos e a evidência de um alto percentual de resultados falsos negativo portanto não recomendando o uso do sistema manual para a rotina de hemoculturas.

Cistinúria - relato de caso e revisäo de literatura / Cystinuria - report of case and revision of literature

Cistinúria é uma doença genética autossômica recessiva, que na forma heterozigota leva a moderadas excreçöes dos aminoácidos cistina, lisina, arginina e ornitina na urina, e na forma homozigota leva à perda maciça dos quatro aminoácidos na urina e alto risco de formaçäo de cálculos renais. Descrevemos aqui o caso de uma criança, com história familiar de formaçäo de cálculos renais, que começou a eliminá-los aos 2 meses de idade, sendo diagnosticada e tratada 4 meses depois. Atualmente, com 4 anos de idade, apresenta funçäo renal normal, teve um episódio de infecçäo urinária e eliminou 10 cálculos após o início do tratamento. Foi submetida a procedimemto cirúrgico para retirada de um cálculo. Nos últimos 3 anos, sob tratamento, näo houve eliminaçäo ou evidência de formaçäo de cálculos renais.(au)